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2017年45卷5期

RESEARCH PAPER
High-throughput Screening of Potential Allergens from Complex Proteins of Large Yellow Croaker (Larimichthys crocea) by Mass Spectrometry
Yang YU , Qing-Li GAO , Yang SONG , Jing-Yu ZHANG , Zhi-Bo LI , Wei LI , Yan JIN , Meng LI , Qian-Cheng ZHAO , Yan-Xia QI
2017, 45(5): e1713-e1718. doi: 10.1016/S1872-2040(17)61016-8
[摘要](284) [FullText PDF](15)
摘要:
The allergenicity of large yellow croaker (Larimichthys crocea) proteins has been widely reported to cause many serious food safety problems. In this study, the protein sample extracted from Larimichthys crocea was digested and analyzed by reversed phase liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (RPLC-MS/MS) for globally proteomic analysis, and the Larimichthys crocea proteins were digested with simulated gastric fluid (SGF) at different time intervals and separated by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The digestion-resistant proteins were further done with in-gel digestion and analyzed by RPLC-MS/MS. Then, sequence homology analysis between identified proteins and known allergens was performed. Results showed that 33 kinds of distinct proteins were feasibly identified from Larimichthys crocea by RPLC-MS/MS and the protein band (approximately 44.0 kDa) presented in SDS-PAGE was considered as protein-resistant to SGF digestion. Two potential allergens, β-enolase and tropomyosin α-1 chain, were found from proteins resistant to SGF digestion by sequence homology analysis. It was observed that most of these SGF digestion-resistant proteins were potential allergens with high sequences similarity to the known protein allergens from other species. Therefore, this strategy provides an efficient alternative for potential allergens screening with high-throughput, which exhibits great potential application in fish protein allergens related food safety control.
Simultaneous Determination of Plant Growth Regulators in Fruit by Ultra-performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Coupled with Modified QuEChERS Procedure
Zhen YAN , Ji-Yun NIE , Yang CHENG , Zhi-Xia LI , Guo-Feng XU , Hai-Fei LI
2017, 45(5): e1719-e1725. doi: 10.1016/S1872-2040(17)61015-6
[摘要](346) [FullText PDF](17)
摘要:
Five plant growth regulators, uniconazole, 6-benzyladenine, kinetin, 4-chlorophenoxyacetic acid and diethyl aminoethyl hexanoate, frequently used in apple, grape, strawberry, peach and orange, were determined by ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS). A modified QuEChERS (Quick, easy, cheap, effective, rugged and safe) procedure was used in sample pretreatment, which involved extraction with acetonitrile containing 1% acetic acid and clean-up with a mixture of ODS and MgSO4. Mass spectrometric determination was performed in multiple reaction monitoring mode (MRM) using external standards for calibration. The results indicated that the calibration curves for the target analytes were linear in the range of 1-100 μg L-1 with correlation coefficients greater than 0.999. The recoveries at three spiked levels ranged from 71.82% to 109.24% with RSDs from 0.57% to 12.43%. The respective limits of detection (LOD) and limits of quantification (LOQ) were 0.15-0.45 μg kg-1 and 0.51-1.50 μg kg-1 for uniconazole, 0.28-0.53 μg kg-1 and 0.94-1.75 μg kg-1 for 6-benzyladenine (6-BA), 0.15-69 μg kg-1 and 0.51-2.29 μg kg-1 for kinetin (6-KT), 0.22-0.60 μg kg-1 and 0.74-2.01 μg kg-1 for 4-chlorophenoxyacetic acid (4-CPA), 0.88-1.89 μg kg-1 and 2.89-6.29 μg kg-1 for diethyl aminoethyl hexanoate (DA-6).
Scientific Papers
基于壳层隔绝纳米粒子和在线裂解-吹扫捕集的血液氰化物表面增强拉曼光谱快速检测方法
朱颖洁 , 郭磊 , 刘易 , 龚莹 , 邱泽武 , 吴剑峰 , 谢剑炜
2017, 45(5): 627-632. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160902
[摘要](358) [FullText PDF](11)
摘要:
建立了一种快速、简便的基于壳层隔绝纳米粒子和在线裂解捕集技术的血液氰化物表面增强拉曼光谱(SERS)检测方法。构建了新型在线裂解-吹扫捕集装置,通过浓H2SO4酸化,将全血中结合态氰化物裂解,并转化为挥发性的HCN气体,经N2吹扫至碱液中形成NaCN,实现了中毒血液中氰化物的高效裂解与捕集;在强碱性条件下,以壳层隔绝金纳米粒子为基底,极大地削弱了氰化物的溶金效应,使得检测信号稳定,存在时间由普通金纳米粒子的5 min提高至1 h;方法检出限达10 μg/L,线性范围为100~2000 μg/L。将此方法应用于氰化物染毒大鼠及真实氰化物中毒患者全血的快速检测,为氰化物中毒快速检测提供了一种灵敏、特异、可靠的新方法。
利用代谢组学研究大气细颗粒物的生殖毒性效应
王晓飞 , 蒋守芳 , 张维冰 , 张凌怡 , 刘颖 , 杜晓妍 , 张洁 , 申河清
2017, 45(5): 633-640. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.170020
[摘要](340) [FullText PDF](15)
摘要:
大气细颗粒物(PM2.5)污染已成为严峻的环境问题,探究PM2.5的毒性效应和机理变得尤为重要。本研究利用基于液相色谱/质谱的代谢组学技术,分析经PM2.5悬混液气管滴注暴露后成年雄性大鼠睾丸代谢组的全局变化,采用偏最小二乘判别分析法和非参数检验进行统计分析。结果表明,PM2.5暴露组大鼠睾丸的油提和水提代谢指纹谱均可与对照组实现准确区分,表明PM2.5暴露对大鼠睾丸的整体代谢网络产生了显著影响,最终鉴定出56个差异代谢物。通路分析显示,PM2.5暴露会引起大鼠睾丸的氨基酸和核苷酸代谢紊乱、类固醇激素代谢失衡以及脂类代谢异常,而这些重要通路可能是PM2.5生殖毒性的关键分子事件。
基于脂质代谢组学研究褐藻糖胶对黄颡鱼幼鱼的影响
徐盼盼 , 宋悦 , 陈娟娟 , 杨锐 , 严小军 , 钟琪
2017, 45(5): 641-647. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160748
[摘要](255) [FullText PDF](10)
摘要:
采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,结合多元变量数据分析方法,研究0.1%褐藻糖胶喂养黄颡鱼幼鱼1~8周的脂质代谢组学。通过不同喂养时间的黄颡鱼脂质成分的重要性(VIP)值和差异性(P)值,筛选出98个差异性代谢物,其中鉴定出与褐藻糖胶对黄颡鱼随喂养时间变化的影响有重要作用的11种脂质生物标志物,包括Lyso-PC 16:0、PC 22:6/16:0、PE 22:6/16:0、PI 18:0/22:6、DAG 16:0/16:0、DAG 16:0/18:1、DAG 18:1/18:1、TAG 20:5/16:0/18:3、TAG 20:4/16:1/18:2、TAG 16:0/18:2/20:5和TAG 18:2/14:0/18:1。研究表明,经0.1%褐藻糖胶喂养不同时期的黄颡鱼中Lyso-PC、PC、PE和PI的含量在第8周时达到最大值;DAG的含量呈现出先减少后增加的变化规律,而TAG的变化不定,TAG 18:2/14:0/18:1、TAG 20:5/16:0/18:3和TAG 20:4/16:1/18:2的含量随着喂养褐藻糖胶时间的延长而增加,而TAG 16:0/18:2/20:5呈减少的趋势。根据上述实验结果,推测褐藻糖胶可能通过调节脂质成分的含量来增加黄颡鱼幼鱼的免疫力。本研究结果为褐藻糖胶对黄颡鱼脂质代谢响应机理的影响的研究提供理论依据。
大豆苷元与氨基修饰β-环糊精包合物的制备、表征及水溶性
邓颖慧 , 苏丽娜 , 庞艳华 , 郭亚飞 , 王芬 , 廖霞俐 , 杨波
2017, 45(5): 648-653. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160747
[摘要](351) [FullText PDF](7)
摘要:
采用饱和水溶液法制备了大豆苷元分别与两种氨基修饰β-环糊精(ACD)即单-6-氨基-β-环糊精(NCD)和单-6-乙二胺基-β-环糊精(ENCD)的固体包合物,并获得最佳包合条件:大豆苷元与环糊精投料比为3:1(n/n),搅拌时间为72 h,分别获得83%和67%的产率。利用X-射线粉末衍射和热重分析对其进行了表征,证实了两种包合物的形成。利用Job's曲线法确定了主客体的包合比为1:1,并利用荧光光谱滴定分析测得其包合稳定常数KS分别为899.2和203.8 L/mol。水溶性实验表明,通过与NCD和ENCD形成包合物,25℃下大豆苷元在水中的溶解度由原来的8.31 μg/mL增至15.2和13.2 mg/mL,分别提高了约1800和1500倍。
磷脂微乳电动色谱的定量结构保留关系研究
宋静 , 郑园 , 霍长虹 , 刘建芳
2017, 45(5): 654-661, 753. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160732
[摘要](278) [FullText PDF](9)
摘要:
以大豆磷脂为主要的表面活性剂,制备适合毛细管电动色谱使用的不同构成比的微乳体系,应用溶剂化参数模型研究了中性溶质在其中的定量结构保留关系。使用动态涂层毛细管,以二甲基亚砜和十二烷基苯分别作为电渗流和微乳液滴迁移的标记物,测定了26个具有不同结构小分子中性化合物在17种微乳电动色谱体系下的保留因子,建立了线性溶剂化能量关系(LSER)方程。通过比较两体系的LSER方程系数比较体系相似性。结果表明,本研究建立的磷脂微乳电动色谱体系在线性溶剂化特征上和其它构成的微乳电动色谱体系相似。对溶质保留贡献较大的是溶质体积和有效氢键碱度,油相种类及浓度对溶质的保留选择性无明显影响。
多肽在金纳米粒子表面偶联反应效率研究
张强 , 李瑞雪 , 陈鑫 , 何兴兴 , 韩爱玲 , 方国臻 , 刘继锋 , 王硕
2017, 45(5): 662-667. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160799
[摘要](368) [FullText PDF](11)
摘要:
通过1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化反应将多肽偶联到金纳米粒子表面,采用荧光光谱研究其形成的酰胺键的反应偶联效率。考察了实验条件,包括缓冲液的种类(HEPES、Tris-HCl、硼酸、PBS缓冲液)、pH值(pH 6.5~9.0)、缓冲液浓度(10,25,40和50 mmol/L)、NHS和EDC的浓度(NHS 0.2~1.0 mol/L,EDC 0.01~0.5 mol/L)及二者比例(0,0.5,1.0,2.0和2.5)、偶联反应时间(4,8,12,24和36 h)等对偶联效率的影响,筛选出最佳实验条件。实验结果表明,25 mmol/L 4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)缓冲液(pH 7.0),NHS/EDC浓度为0.4 mol/L/0.2 mol/L和24 h的反应时间为EDC-NHS活化反应将多肽偶联到金纳米粒子上的最佳实验条件。本研究结果可为相关研究提供技术参考。
基于同步辐射X射线荧光光谱和X射线吸收近边结构谱研究铅锌矿区浮萍中砷的耐受机制
储彬彬 , 罗立强 , 马艳红
2017, 45(5): 668-673. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.170025
[摘要](267) [FullText PDF](17)
摘要:
水生植物浮萍能够富集高浓度的砷,是植物过滤修复技术的代表,其耐受机理备受关注。本研究利用同步辐射X射线荧光光谱(Synchrotron radiation X-ray fluorescence,SRXRF)和X射线吸收近边结构谱(X-ray absorption near edge structure,XANES)技术,开展了铅锌矿区天然富砷浮萍样品中砷元素的微区分布和形态特征研究。微区SRXRF分析了两个单片浮萍样品FP1和FP2,单点扫描时间分别为5 s和2 s,光斑尺寸分别为70 μm×80 μm和100 μm×100 μm;对FP2样品选择了6个位置进行了微区XANES单点形态分析,扫描的能量范围为11.81-11.96 keV;整体XANES形态分析是针对压片的浮萍样品,扫描的能量范围为11.67-12.27 keV。结果表明,浮萍样品整体和微区XANES数据均表明砷形态为As(Ⅲ);SRXRF微区分析发现浮萍中砷元素具有显著的叶脉分布特征,在一定浓度范围内,砷并不扩散到进行光合作用的叶肉中,有利于减轻砷对叶片的毒害作用,可能是浮萍耐受砷的一个保护机制。
血清脂质组学研究中多重离子化液相色谱-质谱方法的比较
王中华 , 陈艳华 , 徐婧 , 陈蕙莉 , 周霞 , 肖新华 , 平凡 , 贺玖明 , 再帕尔·阿不力孜 , 张瑞萍
2017, 45(5): 674-680. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160863
[摘要](209) [FullText PDF](8)
摘要:
系统地比较了3种常用的离子化技术电喷雾电离(ESI)、大气压化学电离(APCI)、大气压光致电离(APPI)对脂类化合物的离子化效率、检测灵敏度和覆盖范围,以探讨多重离子化液相色谱-质谱(LC-MS)方法在血清脂质组学研究中的适用性。血清样本经甲基叔丁基醚萃取后,采用Ascentiss Express C8色谱柱(150 mm×2.1 mm,2.7 μm)和二元线性梯度洗脱分离,流动相(A)为乙腈-水(3:2,V/V,含0.1%甲酸,10 mmol/L甲酸铵),B为异丙醇-乙腈(9:1,V/V,含0.1%甲酸,10 mmol/L甲酸铵),分别采用ESI、APCI和APPI离子源正、负离子模式进行质谱检测。结果表明,ESI离子源对脂肪酸类、甘油脂类、甘油磷脂类化合物、鞘磷脂类化合物的离子化效率最高,对异戊烯醇脂类化合物的离子化效率与APPI离子源相当,APPI离子源对胆固醇(酯)类化合物的检测灵敏度最高,APCI离子源对各类化合物的检测灵敏度均低于ESI或APPI离子源;采用ESI和APPI离子源相结合的LC-MS脂质组学分析方法可以提高分析方法的整体灵敏度和血清中脂类信息检测的完整性。
基于氨基柱的高效液相色谱-示差折光检测器方法分析媚丽葡萄香气糖苷的糖基组成
汪兴杰 , 张予林 , 刘吉彬 , 陶永胜
2017, 45(5): 681-686. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160750
[摘要](846) [FullText PDF](7)
摘要:
建立了基于氨基柱的高效液相色谱分析媚丽葡萄香气糖苷的糖基组成的方法。媚丽葡萄果皮经提取缓冲液(0.1 mol/L Na2HPO4-NaH2PO4,pH 7.0,13%(V/V)乙醇)浸提,葡萄香气糖苷提取物在柠檬酸-磷酸盐缓冲液(pH 5.0)中用AR2000糖苷酶水解,释放出糖基,经氨基柱分离,用高效液相色谱-示差折光检测器(HPLC-RID)分析。色谱分析条件为:柱温35℃,RID温度35℃,进样量20 μL,流动相为乙腈-乙酸乙酯-水(60:25:15,V/V),流速1.0 mL/min。结果表明,鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、芹菜糖和葡萄糖在线性范围内线性关系良好(R2>0.996),检出限为93~123 mg/L,定量限309~409 mg/L,5 g/L各单糖的峰面积的精密度(n=10)为2.3%~6.4%;糖基样品的各单糖加标回收率在73.8%~125.7%之间。以糖基类别划分的媚丽葡萄各类香气糖苷的摩尔百分比为:6-O-α-L-吡喃鼠李糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,4.1%~6.1%;6-O-β-D-吡喃木糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,2.3%~8.8%;6-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,0.1%~3.9%;6-O-α-L-呋喃芹菜糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,5.5%~9.8%;6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,76.3%~86.8%。媚丽葡萄成熟过程中,各类香气糖苷的含量及其总量与浆果成熟度之间没有明显的相关性。
加速溶剂萃取法与索氏提取法对废线路板中二噁英测定的影响
蔡璐 , 赵文杰 , 周全法
2017, 45(5): 687-692. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160767
[摘要](322) [FullText PDF](9)
摘要:
将经过多级破碎分选所得的废线路板粉末过60目筛,以2 mol/L HCl溶液、超纯水洗涤,并用丙酮脱水。将预处理后的滤渣、滤纸填入萃取池,或者用新滤纸包裹后置于索氏提取管内,添加5 μL内标物,分别用加速溶剂萃取法(ASE)或索氏提取(SE)法进行萃取,依次采用多层硅胶柱和活性炭柱对萃取提取物进行净化、洗脱,得到二噁英测试样品。用同位素稀释-高分辨气相色谱-质谱联用仪分析样品中二噁英的含量。考察两种提取方法及不同氯代数对15种13C-2,3,7,8-PCDD/Fs回收率的影响,比较两种方法的准确度和精密度。结果表明,ASE和SE对15种13C-2,3,7,8-PCDD/Fs的回收率分别为54.3%~113.0%和28.3%~77.7%,实测废线路板中二噁英毒性当量(Toxic equivalent quangtity,TEQ)分别为0.075 ng TEQ/kg和0.266 ng TEQ/kg。在方法精密度允许范围内,ASE相对具有简单快速、溶剂用量少和准确的优势。
基于化学指纹图谱和抗血小板聚集效价的丹参质量评价
刘振杰 , 史志龙 , 王伽伯 , 张海珠 , 李春雨 , 牛明 , 何琴 , 甄汉深 , 肖小河
2017, 45(5): 693-699. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160864
[摘要](335) [FullText PDF](11)
摘要:
通过化学分析和生物活性评价考察丹参药材的品质差异,探讨丹参抗血小板聚集生物活性的主要贡献成分。采用高效液相色谱(HPLC)技术建立丹参药材HPLC指纹图谱,以抗血小板聚集相对效价作为指标,评价不同产地不同批次丹参药材的品质差异,构建基于化学表征及生物效价测定的评价模式。结果表明,不同批次丹参药材的HPLC指纹图谱相似度很高(相似度0.930~0.998),而其抗血小板聚集相对效价相差10倍,提示化学指纹图谱难以反映丹参的活性和质量差异。通过化学指纹图谱与抗血小板聚集生物效价进行谱效相关分析,筛选出与生物活性相关系数大于0.5的6个色谱峰:二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA及2个未知化合物。对上述4种已知化合物单体进行活性验证发现,隐丹参酮的抗血小板聚集活性最强,而其它3种丹参酮类化合物几乎没有体外抗血小板聚集活性。进一步比较丹参中高含量成分丹酚酸B与低含量成分隐丹参酮的活性贡献,结果表明,两者的活性贡献基本相当,说明隐丹参酮是丹参中低含量高活性成分,对评价丹参质量具有重要贡献度。
光谱法研究哈巴俄苷与人血清白蛋白的结合反应
曹团武 , 周坤 , 黄文兵 , 时建伟 , 谭晓平 , 黄春林 , 冉嫒
2017, 45(5): 700-706. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160873
[摘要](394) [FullText PDF](9)
摘要:
在不同温度及模拟血液pH值条件下,采用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究了哈巴俄苷(Harpagoside,HAR)与人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)的结合反应。结果表明,HAR有规律地使HSA内源荧光猝灭,猝灭常数随温度升高而降低,其猝灭机制为两者形成复合物而引起的的静态猝灭;不同条件下两者结合常数KA均大于105 L/mol,结合位点数n≈1。由Van't Hoff方程计算获得了不同条件下HAR与HSA相互作用的热力学参数,由ΔG、ΔH和ΔS均小于0可知,两者结合的主要作用力是氢键和范德华力,且两者结合是吉布斯自由能降低的自发过程。根据Förster非辐射转移理论计,计算了不同条件下HAR与HSA的结合距离r在4.01-4.28 nm范围内,表明两者结合过程发生了非辐射能量转移。同步荧光光谱表征结果表明,HAR使HSA的色氨酸和酪氨酸残基所处的微环境极性增强,疏水性减弱,导致HSA构象发生了一定程度的改变。
气泡微萃取-气相色谱-质谱法测定尿中咖啡因
宋爱英 , 王丽红 , 张延霞 , 石恩林 , 曾俊菱
2017, 45(5): 707-712. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160862
[摘要](284) [FullText PDF](36)
摘要:
建立了气泡微萃取结合气相色谱/质谱技术(GC-MS)测定尿中咖啡因的方法。对影响萃取效率的实验条件进行了优化,确定了最佳萃取条件:三氯甲烷作为萃取溶剂,萃取溶剂暴露体积1 μL,气泡体积1.6 μL,搅拌速度300 r/min,萃取时间5 min,盐度15%(m/V),气泡与磁子间距离1 cm。在优化条件下,所建立方法在咖啡因浓度0.005~10 mg/L范围内有较好的线性关系,相关系数可达0.986,检出限为0.003 mg/L。在人尿液中添加不同浓度的咖啡因(0.050、0.500和5.000 mg/L),回收率为89.2%~107.5%,相对标准偏差小于8%(n=6)。
还原氧化石墨烯-多壁碳纳米管复合膜负载金纳米粒子修饰玻碳电极检测双酚A
于浩 , 冯晓 , 陈小霞 , 乔金丽 , 高小玲 , 徐娜 , 高楼军
2017, 45(5): 713-720. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160768
[摘要](267) [FullText PDF](16)
摘要:
以水合肼为还原剂,采用均相还原法制备还原氧化石墨烯-多壁碳纳米管复合材料(rGO-MWCNTs),通过滴涂法将其修饰到玻碳电极(GCE)表面。以此复合材料为载体,采用电化学方法制备了金纳米粒子-还原氧化石墨烯-多壁碳纳米管复合膜修饰电极(AuNPs-rGO-MWCNTs/GCE)。通过扫描电镜(SEM)、EDS能谱技术和电化学方法对此电极进行了表征。研究了双酚A在修饰电极上的电化学行为。结果表明,此电极对双酚A的电极过程具有良好的电化学活性,在0.10 mol/L PBS溶液(pH 7.0)中,微分脉冲伏安法测定双酚A的线性范围为5.0 × 10-9~1.0 × 10-7 mol/L和1.0 × 10-7~2.0 × 10-5 mol/L,检出限为1.0 ×10-9 mol/L(S/N=3)。将此电极用于模拟水样和超市购物小票样品中双酚A含量的测定,加标回收率分别为97%~110%和98%~104%。
基于计时库仑技术的可再生型三磷酸腺苷适配体电化学传感器的研究
卢莹 , 田燕 , 王莉 , 杨耀 , 姚晓林
2017, 45(5): 721-726. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160645
[摘要](375) [FullText PDF](8)
摘要:
构建了一种可再生型三磷酸腺苷(ATP)适配体计时库仑电化学传感器。将一条短链DNA通过AuS键自组装固定在电极表面,ATP的核酸适配体与该短链DNA杂交而结合在电极表面。带负电的DNA通过静电吸引结合电解液中的六氨合钌(RuHex)阳离子。当传感器和靶分子ATP孵育后,ATP与核酸适配体结合,使适配体链从电极表面解离,电极表面吸附的DNA量减少,结合RuHex的量随之降低。通过计时库仑技术检测RuHex响应信号降低的量,可以对ATP进行定量测定。此传感器的电化学响应信号与ATP浓度对数值呈线性关系,线性检测范围为0.001~100 μmol/L,检出限(S/N=3)为0.5 nmol/L。此传感器检测靶分子ATP后,可以通过简单的操作步骤再生,再生5次后的响应信号为初始信号的90%以上。采用此传感器检测大鼠脑透析液中ATP的含量为(19.2±3.7)nmol/L(n=3)。
红霉素分子印迹二维光子晶体水凝胶传感器的研究
高敏君 , 刘根起 , 薛亚峰 , 陈小娟 , 师维江 , 范晓东
2017, 45(5): 727-733. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160771
[摘要](440) [FullText PDF](10)
摘要:
以红霉素为印迹分子,聚苯乙烯二维光子晶体为模板,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸甲酯为交联剂,2,2-二乙氧基苯乙酮为引发剂,紫外光引发聚合,在甲醇-乙酸(9:1,V/V)中洗脱印迹分子,得到能够特异性识别红霉素的分子印迹二维光子晶体水凝胶。通过测试德拜环直径变化,研究了此水凝胶在红霉素溶液中的响应性能。实验结果表明,当红霉素的浓度从0增加到1×10-6 mol/L时,德拜环直径增加6 mm,相应的晶格间距减小30 nm。此外,水凝胶在1×10-6 mol/L红霉素的类似物罗红霉素、琥乙红霉素溶液中,德拜环直径仅分别增加1.5和2.0 mm,表明此光子晶体水凝胶具有良好的选择性,有望用于红霉素低成本的简易检测。
羧基甜菜碱型亲水作用色谱柱的制备及性能研究
常宇阳 , 戴小军 , 龚波林
2017, 45(5): 734-740. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160787
[摘要](387) [FullText PDF](11)
摘要:
以甲基丙烯酰氧乙基二甲基乙酸铵(CBMA)为功能单体,利用表面引发原子转移自由基聚合(Surface-initiated atom transfer radical polymerization,SI-ATRP)技术,将CBMA接枝到硅胶表面,得到接枝聚合物CBMA的亲水作用色谱固定相(Silica-CBMA)。通过改变SI-ATRP反应体系中单体的浓度,制备了3种不同接枝量的亲水作用色谱固定相。考察了Silica-CBMA固定相对有机酸类化合物的分离性能以及流动相中pH值、盐浓度、水含量等因素对溶质保留行为的影响。结果表明,在亲水作用色谱模式下,Silica-CBMA固定相对有机酸类化合物的分离是离子交换作用与亲水作用的混合色谱模式。流动相中盐浓度增大,溶质保留减弱,符合离子交换作用特征;固定相和溶质的离子化程度受流动相pH值影响较大,pH值增大,溶质保留增强;而溶质的保留时间随流动相水含量增加而降低则是典型的亲水作用色谱特征。使用自制Silica-CBMA柱,建立了芦丁片中维生素C、芦丁含量的亲水作用色谱测定方法,操作方法简单,为强极性样品的分离测定提供了新方法。
分子模拟-活性自由基聚合法制备山奈酚分子印迹整体柱及其性能评价
买买提·吐尔逊 , 热萨莱提·伊敏 , 买合木提江·杰力 , 古丽巴哈尔·达吾提 , 楚刚辉 , 尹学博
2017, 45(5): 741-746. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160320
[摘要](376) [FullText PDF](8)
摘要:
通过分子模拟研究模板分子与功能单体的相互作用,可以缩短优化时间,为选取合适的功能单体以及模板分子/功能单体比例提供依据。本研究以山奈酚为模板分子,通过分子模拟优化实验条件,确定以甲基丙烯酸(MAA)为最优的功能单体,山奈酚/MAA最佳比例为1:4(w/w)。此外,以二苄基三硫代碳酸酯(DBTTC)为可逆加成-链断裂转移剂,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,实现了仅需优化引发剂和可逆加成-断裂链转移聚合(RAFT)试剂即可制得性能优异的山奈酚分子印迹整体柱。此整体柱对山奈酚和相似物槲皮素的分离度为1.52,相对标准偏差为1.8%。实验结果表明,分子模拟计算简化了实验步骤,以DBTTC为RAFT试剂得到了具有更好形态和结构的分子印迹整体柱。
一种聚丙烯酸接枝型荧光纳米粒子的制备、性能及细胞成像
廖晓燕 , 梁淑彩 , 刘羽萍 , 张静雅 , 鄢国平
2017, 45(5): 747-753. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160757
[摘要](418) [FullText PDF](6)
摘要:
N-氨基-4-N-甲基哌嗪-1,8-萘酰亚胺(AMN)通过酰胺化反应接枝到聚丙烯酸链上,利用生成的聚合物在水溶液中的自组装,制备了一种水溶性荧光纳米粒子(PAAMN)。采用紫外可见光谱、核磁共振氢谱、透射电镜、动态光散射和荧光光谱方法对PAAMN进行了表征,MTT法检测其细胞相容性,最后用荧光显微镜观察其自身荧光及细胞成像效果。实验结果表明,PAAMN为球状结构,萘酰亚胺荧光团的摩尔取代度为4.1%;在生理pH条件下,以390 nm为激发波长,PAAMN在534 nm处发射较强的荧光,且光稳定性较好;在pH 4.0~10.0范围内,其荧光波长无明显变化,荧光强度随pH值增大而逐渐减小,但pH敏感程度小于AMN。PAAMN具有良好的细胞相容性,能进入细胞,且在~390 nm激发光下发射绿色荧光,可用于细胞成像。
紫外光谱法结合化学计量学用于环境水样中2, 4, 6-三硝基甲苯及其分解物的同时测定
王露 , 熊庆 , 郭彩红 , 李梦龙 , 蒲雪梅
2017, 45(5): 754-761. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160834
[摘要](343) [FullText PDF](14)
摘要:
结合紫外吸收和偏最小二乘法建立了环境水样中2,4,6-三硝基甲苯及其分解物的分析方法,在不经过任何预先分离的情况下,实现了环境水样中2,4,6-三硝基甲苯(TNT)及其分解物2,4-二硝基甲苯(2,4-DNT)和2,6-二硝基甲苯(2,6-DNT)的快速准确测定。采用正交试验设计(OAD)配制了25个训练集样本和15个独立预测集样本,采用变量种群分析(VCPA)方法挑选特征变量以提高偏最小二乘法(PLS)模型的预测效果,预测集中每个物质的相关系数R2均达到0.99。将最优的VCPA模型用于真实水样中TNT以及DNT的检测,并采用HPLC方法进行了验证。实验结果显示,VCPA模型的回收率与HPLC法相近。紫外光谱法结合化学计量学方法可作为环境体系中多成分同时测定的一种简便、快速、有效的方法。
磁性氮掺杂石墨烯固相萃取环境水样中的4种有机氯污染物
陈林吉 , 朱晁乐 , 曹小吉 , 周婷 , 叶学敏 , 莫卫民
2017, 45(5): 762-769. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.170016
[摘要](275) [FullText PDF](13)
摘要:
采用化学共沉淀法成功合成了磁性氮掺杂石墨烯纳米材料,对其吸附性能进行了初步探讨。此磁性纳米材料对对氯间二甲苯酚的吸附不局限于均匀的单分子层吸附,吸附动力学符合准二级动力学模型。将其作为磁性固相吸附剂,通过对吸附剂用量、超声萃取时间、水样pH值、上样体积等条件的优化,建立了超声辅助磁性固相萃取-气相色谱/串联质谱同时测定环境水样中的三氯生(TCS)、对氯间二甲苯酚(PCMX)、六氯苯(HCB)和2,2',4,4',5,5'-六氯联苯(PCB-153)4种有机氯污染物的方法。在优化条件下,将6.0 mg Fe3O4/N-G分散于100 mL水样中,调节水样至pH 5,超声萃取15 s,磁性分离,3 mL乙醇和2 mL二氯甲烷分步洗脱,洗脱液氮吹定容,进行气相色谱-质谱联用分析。4种有机污染物在0.1~10 μg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.9983~0.9999,检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为0.05~0.6 ng/L和0.4~2.4 ng/L,3个加标浓度水平的回收率为68.3%~103.4%,日内、日间测定的相对标准偏差分别为3.3%~6.9%和3.4%~9.4%(n=6)。本方法简单方便,易于操作,适用于环境水样中有机氯污染物的检测。
高效液相色谱-荧光衍生法快速测定地沟油中的长链脂肪醛
王婉 , 于清峰 , 肖莹 , 何华
2017, 45(5): 770-776. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160893
[摘要](481) [FullText PDF](18)
摘要:
本研究利用地沟油精炼过程中会产生醛类化合物的特点,以O-(3-(9H-咔唑-9-基)丙基)羟胺为荧光衍生化试剂,采用高效液相色谱法测定己醛、庚醛、辛醛、壬醛、癸醛5种长链脂肪醛来鉴别地沟油及食用油中是否掺杂地沟油。10 μL待测油样品溶于200 μL异丙醇,在最佳条件下与O-(3-(9H-咔唑-9-基)丙基)羟胺反应生成稳定的衍生物,乙腈萃取后进样分析。以乙腈-水(90:10,V/V)为流动相,在λex/λem=292 nm/348 nm下荧光检测,衍生物在C18柱上15 min内可完全分离。检测5种脂肪醛的线性范围均为0.01~1.00 μmol/L,检出限为0.05~0.10 nmol/L,加样回收率为95.6%~101.4%。待测油样品的测定结果表明,食用油基本不含上述5种脂肪醛,而精炼地沟油中5种脂肪醛含量显著增加,因此5种脂肪醛含量可作为检测地沟油的指标。本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,方便,快捷,可用于快速检测地沟油。
QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定食用菌中7种荧光增白剂
张宪臣 , 李蓉 , 周艳萍 , 薄艳娜 , 王京力 , 胡仪光
2017, 45(5): 777-783. doi: 10.11895/j.issn.0253-3820.160866
[摘要](328) [FullText PDF](32)
摘要:
建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定食用菌中7种荧光增白剂残留量的检测方法。样品前处理采用QuEChERS方法,食用菌样品用水浸润后,以甲酸和乙腈提取目标物,C18填料、正丙基乙二胺(PSA)和MgSO4净化,C18色谱柱分离,乙腈和0.1%甲酸梯度洗脱,多反应监测(MRM)正离子模式扫描。在优化条件下,7种荧光增白剂在一定质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.991,方法检出限(S/N=3)在0.05-0.40 μg/kg之间,定量低限(S/N≥10)在0.2-1.3 μg/kg之间,方法的平均回收率在70.1%-109.2%之间。本方法具有操作简单快捷、灵敏度高等优点。