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LC-5510检测人参产品中人参皂甙分析的应用

来源:东西分析 阅读数:100 时间:2020-06-19 16:50:59

人参

人参是多年生草本植物,是众所周知的名贵药材。有强身健体、益寿延年的功效。经现代医学研究及化验分析表明,人参内含有一种叫人参皂甙Ginsenoside,简称GS的化学物质,它对调节人的中枢神经系统、强心、抗疲劳、调节物质代谢等有明显功效,是人参的主要活性成分。


现已明确知道的GS单体约有40余种,ReRgRfRbRc等。因此人参皂甙的含量是评价人参质量的重要指标。《中国药典》和GB/T 22996-2008均采用液相色谱法对人参中人参皂甙的成分及含量进行测定,有利于全面、有效的评价人参的质量。

本文对比了2015版《中国药典》和GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》两种分析方法6种主要人参皂甙的测定

        实验部分



实验设备和试剂


LC-5510液相色谱

    P-101A高压输液泵

    LC-5510紫外检测器

    LC-5510柱温箱

    DM-101在线脱气机

人参皂甙对照品(Re,Rg1,RfRb1RcRb2

人参粉样品

甲醇(色谱纯)

乙腈(色谱纯)


样品处理:

准确称取人参粉末样品1g左右(精确至0.0001g)于50mL容量瓶中,加入甲醇超声45min,定容,过0.45μm滤膜,待测。


色谱条件1

参照《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法

色谱柱:C18柱,250mm×4.6 mm5μm

流速:1mL/min

柱温:45℃

检测波长:203nm

进样量:20μL

流动相:A:乙腈;B:水,按表1梯度洗脱


表1 梯度洗脱程序

图1 色谱条件1—人参皂甙标样谱图


图2 色谱条件1—人参样品谱图

表2 色谱条件1人参皂甙的保留时间列表


色谱条件2

参照2015版《中国药典》

色谱柱:C18柱,250mm×4.6 mm5μm

流速:1mL/min

柱温:35℃

检测波长:203nm

进样量:20μL

流动相:A:乙腈;B:水,按表3梯度洗脱


表3 梯度洗脱程序


图3 色谱条件二人参皂甙标样谱图


图4 色谱条件2—人参样品谱图

表4  色谱条件2人参皂甙的保留时间列表


         结论与讨论  


GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》标准中的分析方法,ReRg1不能完全分离,但分析方法时间短,仅需30min.

《中国药典》的参考方法各组分离度较好,但是分析时长需要100min

通过实验结果与《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》中的方法比较,说明:

  1. 提高柱箱温度可以缩短分析时间;

  2. 不同厂家的色谱柱对人参皂甙的分离有差异;

  3. 增加有机相(乙腈)比例,可明显缩短分析时间;

  4. 在增加乙腈比例缩短分析时长的同时,会影响到人参皂甙各组分的分离度,并且人参样品中的其他组分会影响目标组分的分离;

  5. GB/T22996-2008 人参中多种人参皂甙含量的测定 液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》中的分析方法还可进行优化,在保证满足分离度的情况下,通过调整流动相梯度程序和柱温,可进一步改善分析方法,缩短分析时间。