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新一代生物液相色谱,专为生物制药行业设计

来源:安捷伦科技 阅读数:80 时间:2020-12-28 11:48:33
从最初的单抗药物到现在双抗和抗体药物偶联物(ADC)药物的异军突起,伴随而来的还有基因治疗和细胞治疗技术的广泛应用,生物制药领域正处于蓬勃发展的阶段。推动这些新型生物治疗药物安全落地、应用于临床,需要可靠的生产和质量控制过程。但生物治疗药物本身结构复杂,给质控增加了难度,对分析检测方法提出了更加严苛的要求。
液相新品,特为生物制药行业设计
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2020 年 11 月,安捷伦科技在慕尼黑生化展隆重推出了全新 Agilent 1290 Infinity II 生物液相色谱系统,它具有极佳的分离能力、出色的稳定性和卓越的分析效率,进一步提高了生物制药客户的工作效率。
更高分离度、更出色稳定性
1290 Infinity II 生物液相色谱是一套超高效液相色谱系统,可用于全面鉴定蛋白质的一级结构,还能够区分蛋白质内异构基团的精确位置。搭配肽谱专用分析柱 Agilent AdvanceBio Peptide Mapping, 2.1 x 250 mm, 2.7 µm 可以得到更高的分离度(图1)和出色的稳定性(表1)。如果采用 Agilent ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18, 2.1 x 150 mm, 1.8 µm 亚二微米色谱柱,可以显著提高分离效率(图1)。并且能够将在普通 C18 色谱柱上无法分离的脱酰胺基化肽段与正常肽段分离(质谱本身不能分离),从而可以精准确认脱酰胺化的位点(图2)。
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图 1. 1290 Infinity II 生物液相色谱系统搭配肽谱专用分析柱(AdvanceBio Peptide Mapping, 2.7 µm, 2.1 x 250 mm 或ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18, 1.8 µm, 2.1 x 150 mm)分析肽谱

表 1. 稳定性结果

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图 2. 分析脱酰胺基化肽
无缝转换
同时 1290 Infinity II 生物液相色谱系统可以实现与原有 1290 Infinity II 超快速液相色谱系统之间方法的无缝转换,解决了客户的后顾之忧。以最复杂且对系统要求最高的肽谱分析为例,在相同的分析条件下,相同的肽段在两套系统上的保留行为完全一致(图3)。
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图 3. 在 Agilent 1290 Infinity II Bio LC 和 Agilent 1290 Infinity II LC 系统上近乎一致的图谱
在分析抗体类生物药物时,表现卓越
由于抗体等生物药物是高度不稳定的活性物质,聚集体分析是最重要的关键质量属性之一。1290 Infinity II 生物液相色谱系统具有最小的系统死体积(选择最合适的毛细管内径图 4),搭配亚二微米颗粒填料填充的现代 SEC 色谱柱,可以得到最佳的分离性能(图 5)。
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图 4. 比较毛细管内径增加对分离度和峰宽的影响
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图 5. pH 诱导产生的 NISTmAb 聚集体的分离
抗体药物的电荷异构体会直接影响药物的安全性和有效性。选择 1290 Infinity II 生物液相色谱系统进行电荷异构体分析,其生物惰性系统可耐受苛刻的高盐条件和极端的 pH 值,避免流动相对系统造成的潜在的腐蚀性损坏,可以最大限度降低 LC 系统对特殊蛋白大分子的吸附,在非常平缓的盐梯度或 pH 梯度条件下得到最佳分析结果(图 6)。
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图 6. 不同盐梯度斜率下 ISTmAb 参比标样分离的方法开发
在抗体药物偶联物(ADC)质量控制时,通常使用疏水相互作用色谱(HIC)测定 ADC 的 DAR 值,常用到高达 2 mol/L 的硫酸铵溶液作为流动相。1290 Infinity II 生物液相色谱系统惰性金属合金材料(MP35N)流路设计避免了高浓度盐缓冲液的潜在腐蚀,同时密封垫清洗和进样针清洗等功能有助于避免出现盐析问题。以本妥昔单抗 ADC 药物为例,表明该系统非常适合在生物色谱条件下使用 ,不仅能够耐受高浓度的腐蚀性盐,且 RT 和峰面积均具有良好的精度(图 7)。
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图 7. 使用 Agilent 1290 Infinity II 生物液相色谱系统分离本妥昔单抗 ADC(7 次叠加色谱图)
出色表现,值得拥有

综上所述,拥有出色表现的 1290 Infinity II 生物液相色谱系统,绝对是生物大分子药物关键质量属性表征的利器。相信随着全球生物制药领域日新月异的发展,安捷伦精益求精的高效液相系统能够帮助生物制药领域的科学家在新药探索的道路上走得更加从容不迫,勇闯未来。

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图 8. Agilent 1290 Infinity II 生物液相色谱系统