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人参皂苷Re在正常和中波紫外线辐射损伤模型大鼠体内药代动力学比较研究
孙岩 , 肖楠 , 李光 , 韩燕燕 , 刘淑莹 , 王恩鹏 , 陈长宝
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171136
建立了超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-QQQ-MS)检测大鼠血浆中G-Re含量的方法,用于比较研究人参皂苷Re(Ginsenoside Re,G-Re)在正常大鼠和UVB辐射损伤模型大鼠体内的药代动力学行为。选用Ascentis® Express C18色谱柱(5.0 mm×3.0 mm,2.7 μm),以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱。电喷雾离子源(ESI)在负离子模式下,选择多反应监测模式(MRM)扫描,内标法定量,用于G-Re定量分析的离子为m/z 991.54/945.53/475.60。方法检出限为4.0 ng/mL,定量限为13.5 ng/mL,G-Re在15~20000 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999);日内和日间精密度、回收率、基质效应和稳定性均能满足药代动力学分析要求。结果表明,两组大鼠分别单次口服50 mg/kg G-Re后,体内代谢过程表现皆符合二室模型特征,正常组和模型组t1/2α分别为(0.21±0.04)h和(0.69±0.07)h,t1/2β分别为(17.08±0.53)h和(21.40±16.77)h,AUC(0-t)分别为(321.91±2.27)μg/(L·h)和(474.99±194.96)μg/(L·h),AUC(0-∞)分别为(332.44±1.66)μg/(L·h)和(518.64±231.39)μg/(L·h),除t1/2α外,两组之间的药代动力学参数具有显著差异(p < 0.05)。本方法准确、灵敏、专属性强、稳定性好,可用于人参皂苷Re的体内药代动力学比较研究。
关键词: 人参皂苷Re, 中波紫外线辐射, 药代动力学
液相色谱-质谱联用技术检测大鼠血浆、肾上腺及下丘脑中神经递质含量
李慧 , 鲁文慧 , 焦丽丽 , 吴巍 , 宋凤瑞 , 刘淑莹
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171472
建立了一种液相色谱-质谱联用技术同时检测γ-氨基丁酸(GABA)、5-羟色胺(5-HT)、酪氨酸(L-tyr)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和肾上腺素(E)6种神经递质的方法,并将本方法用于大鼠肾上腺、下丘脑及血浆中神经递质的检测。以丹磺酰氯为衍生化试剂,以5-羟基色氨酸和咖啡酸为内标,采用UltiMate 3000 RSLC色谱系统、Thermo C18色谱柱(50 mm×3 mm,2.7 μm),流动相为0.1%甲酸和甲醇溶液梯度洗脱,流速0.2 mL/min,进样量2 μL,多反应检测(MRM),正离子模式。GABA、5-HT、L-Tyr、DA、NE、E线性检测范围分别为0.26~620.80 μmol/L、0.034~11.20 μmol/L、1.20~88.00 μmol/L、0.03~41.02 μmol/L、0.01~47.20 μmol/L、0.01~90.24 μmol/L,加标回收率为91.16%~116.20%。本方法可快速准确检测大鼠肾上腺、血浆及下丘脑中神经递质含量,为药理实验的中的指标分析提供了检测技术支持。
关键词: 液相色谱-质谱联用, 肾上腺, 血液, 下丘脑, 神经递质
基于神经化学分析研究炮制对人参和西洋参药性的影响
黄鑫 , 王妮 , 张娜 , 越皓 , 刘淑莹
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191010
基于神经化学分析,采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱技术,考察了人参、西洋参及其炮制品红参、西洋红参对大鼠血浆中神经化学物质的影响。结合化学计量学多元统计分析,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)对数据进行处理,利用判别函数对温凉药性进行识别,筛选温凉药性潜在特征标记物;利用识别模型获得各味中药对应标记物特征值分布,评价人参、西洋参及其炮制品药性差异。结果表明,基于此神经化学分析方法,共筛选出14种温性标记物和10种凉性标记物,其中谷氨酸和苯丙氨酸对温性药性影响最大,甘氨酸和5-羟色胺与凉性相关性最大。红参组与人参组中温性药性标记物所对应的特征值均为正值且红参组大于人参组,即红参药性为温,且在药性上温的程度甚于人参。西洋参组与西洋红参组中凉性药性标记物所对应的特征值均为正值,且西洋参组大于西洋红参组,即西洋红参在药性上凉的程度不及西洋参,揭示了炮制对西洋参药性的影响。结果表明,神经化学物质的变化可以反映中药温、凉药性对生物体的影响,神经化学分析可用于评价中药的药性效应,为中药药性差异的物质基础和药效作用机制研究提供方法学借鉴。
关键词: 神经化学, 人参, 西洋参, 药性
瓜子壳作为新型木质电喷雾材料的分析性能研究
刘喆 , 郭云龙 , 许庆轩 , 刘淑莹
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.181712
建立了一种简单经济实用的电喷雾质谱技术(ESI-MS),利用一次性前端削尖的瓜子壳承载样品,并使其离子化。采用瓜子壳蘸取样品溶液,或通过移液器将样品加入到瓜子壳的凹槽中。瓜子壳的尖端角度在60°~90°范围内,瓜子壳尖端与质谱仪入口之间的距离在2-3 mm范围内,关闭所有去溶剂化气体,在尖端施加3.5-4.0 kV高压后,可获得理想的质谱效果。实验结果表明,这种新技术适用于多种样品的分析,包括木质素、人参皂苷、氨基酸和蛋白质等。将其与传统电喷雾和牙签木尖喷雾进行对比,在检测木质素类物质和人参皂苷及蛋白质分子时,瓜子壳木尖喷雾相较于其它两种电离方式效果更佳。本方法还可分析一些不能通过传统的电喷雾技术直接分析的样品,如固体粉末样品等。在本研究中,参照ESI的单针进样方式设计了一种可连续进样的装置,利用此装置对人参粉末进行在线提取,获得持续稳定的总离子流图,并得到了十分丰富的质谱信息。
关键词: 质谱, 电喷雾, 木尖喷雾, 瓜子壳, 在线提取