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血清中可溶性白介素-2受体胶体金免疫层析试纸检测方法研究
徐凤琴 , 朱群艳 , 张婳 , 王振新
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201723
快速、灵敏地检测血清中的可溶性白介素-2受体(sIL-2R)对相关疾病的临床诊断至关重要。本研究建立了一种基于胶体金免疫层析试纸条的快速、定量检测实际样品中sIL-2R的方法。在硝酸纤维膜上分别包被羊抗兔二抗(2ndAb)和兔抗鼠sIL-2R单克隆抗体(cAb)作为质控线(C线)和检测线(T线);以兔抗鼠sIL-2R单克隆抗体(dAb)修饰的金纳米粒子为标记物,采用双抗体夹心法制备用于sIL-2R检测的免疫层析试纸条。合成了3种不同形貌和粒径的金纳米粒子,考察了其对胶体金标记免疫层析试纸条检测性能的影响。实验结果表明,胶体金标记免疫层析试纸条对sIL-2R的检测性能与金纳米粒子的形貌和粒径密切相关;其中,金纳米棒(Gold nanorod,GNR)标记的免疫层析试纸条具有较宽的线性范围(1~6250 ng/mL)和较低的检出限(1.0 ng/mL)。采用GNR免疫层析试纸条成功实现了荷三阴性乳腺肿瘤(MDA-MB-231) BALB/c裸鼠血清中sIL-2R浓度的检测,结果表明,sIL-2R浓度与肿瘤进程呈正相关。
关键词: 金纳米粒子, 免疫层析, 可溶性白介素-2受体, 恶性肿瘤
金纳米棒免疫层析试纸条定量检测前列腺特异性抗原
张婳 , 李群 , 刘桂锋
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201130
建立了一种基于金纳米棒(GNR)的免疫层析方法,用于快速定量检测前列腺特异性抗原(PSA)。以GNR为标记探针,通过包裹羧基化的聚合物后,采用共价偶联的方式连接抗PSA单克隆抗体形成偶联物,以鼠抗PSA单克隆抗体和羊抗鼠IgG分别喷涂硝酸纤维素膜,形成试纸条的检测线和质控线,采用三明治夹心法构建GNR免疫层析试纸条,用于PSA的定量检测。结果表明,GNR免疫层析试纸条特异性强,稳定性好,灵敏度高,对PSA检测的线性范围为0.1~50 ng/mL,检出限为0.1 ng/mL,批内和批间变异系数均小于10%,且具有良好的保存稳定性。本方法可用于检测血清中PSA的浓度水平,对于前列腺癌的早期诊断、监测治疗及预后判断具有重要意义。
关键词: 金纳米棒, 免疫层析, 前列腺特异性抗原, 定量检测