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云母表面纳米水层中Aβ16-22自组装的研究
陈文勇 , 王建华 , 杨甜甜 , 霍庚阳 , 徐薇 , 李宾 , 周星飞
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201696
淀粉样多肽在"拥挤"环境中的自组装与神经退行性疾病密切相关。本研究在恒温高湿度密闭环境中,获得了云母表面厚度可控的纳米水层,并详细研究了Aβ16-22在纳米水层中的扩散和聚集行为。结果表明,淀粉样多肽可以在纳米水层中扩散,并形成不同高度的纳米片层,而且样品的培养温度和多肽浓度对纳米片层的结构和形态具有决定性的影响。原子力显微镜峰值力定量模式(PeakForce-QNM)测试表明,纳米水层中形成的Aβ16-22纳米片层的弹性模量约为(5.0±0.4)GPa,明显大于溶液中形成的淀粉样纤维的弹性模量((3.1±0.2)GPa)。纳米红外光谱成像显微镜(NanoIR)分析结果表明,云母表面水层中形成的纳米片层的二级结构主要是α-helix,不同于纤维中的β-sheet结构,这可能是引起两者压缩弹性模量差异的原因。
关键词: 纳米水层, 淀粉样多肽, 纳米片层, 弹性模量
调控离子传输的电化学分析研究进展
高铁男 , 熊天逸 , 张斯亮 , 陈明丽 , 王建华 , 毛兰群 , 于萍
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.211261
自19世纪50年代库尔特计数器发明以来,随着单通道电流记录技术及纳米微加工技术的日趋成熟,基于微纳孔道的传感技术逐渐发展成为一种新兴的传感检测平台,因其具有简单、快速、免标记的优势,以及高灵敏度和多功能性而受到广泛的关注。近二十年来,随着研究者对限域空间的离子传输行为的研究以及基于调控固态纳米孔内的离子传输的传感技术的发展,推动了该学科的迅速发展。本文主要从探究离子传输基础行为和调控限域空间内离子传输的分析方法两个方面,对近年来调控固态微纳米孔道中离子传输的电化学分析的原理和方法的研究进展进行了综述。
关键词: 离子传输, 微纳米孔道, 电化学分析, 传感, 评述
谷胱甘肽功能化有序介孔碳用于选择性分离富集痕量镉
李伟涛 , 李轶坤 , 杨婷 , 陈明丽 , 王建华
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171465
将谷胱甘肽修饰到有序介孔碳表面,制备了一种谷胱甘肽功能化的有序介孔碳(GSH-CMK-3),采用傅里叶红外光谱、扫描电镜、热重分析等对其进行了表征。GSH-CMK-3具有优良的化学稳定性和热稳定性,对Cd2+具有较强的吸附性能,静态吸附容量为87.87 mg/g,吸附动力学符合准二级动力学模型。在顺序注射微填充柱分离富集体系中,以0.006 mol/L硫脲(溶于0.2 mol/L HNO3)为洗脱剂,洗脱效率为96%。在最佳实验条件下,进样体积为1000 μL,洗脱体积为50 μL时,富集倍数为17.3,以石墨炉原子吸收为检测器,建立了痕量Cd2+的分离富集分析方法,测定Cd2+的线性范围为0.05~0.20 μg/L,精密度为2.9%(n=13,100 ng/L),检出限为1.9 ng/L(n=7,3σ),对标准物质GBW08608(水中镉、铬、铜、镍、铅、锌成分分析标准物质)中的痕量Cd2+的分析结果与标示值无明显差异。
关键词: 有序介孔碳, 谷胱甘肽, 分离富集, , 石墨炉原子吸收
比率荧光法传感pH检出限的探讨
文慧 , 刘珣 , 张尚青 , 杨婷 , 陈明丽 , 王建华
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.181765
检出限是判断或评价一种分析方法灵敏度的重要参数,与普通荧光探针相比,比率型荧光探针检出限的计算则比较复杂,多数情况下采用空白标准偏差的3倍与标准曲线斜率的比值作为检出限。而当比率荧光探针用于pH检测时,检出限尚无统一定义。本研究通过归纳总结发现,根据检测所得数据形式,可将比率型荧光探针分为3种,并据此设计了一种激发波长为365 nm、发射波长为600 nm/450 nm的模拟探针。通过对3种不同类型的pH比率型荧光探针检测的模拟数据进行分析,以光谱方法的检出限计算公式为原型,提出了检出限的计算公式。本方法可用于不同种类pH比率型探针方法灵敏度的比较。
关键词: 比率型荧光探针, pH传感, 灵敏度, 模拟数据
荧光成像-电感耦合等离子体质谱关联定量分析细胞内铜纳米粒子
郑安琪 , 郝亚男 , 果婷婷 , 舒杨 , 王建华
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201270
建立了对细胞摄入的铜纳米粒子(GuNPs)进行定量分析的荧光成像法。以近红外发光的谷胱甘肽-铜纳米粒子(GSH-CuNPs)与MCF-7细胞孵育,利用共聚焦显微镜在激发波长559 nm、发射波长600~700 nm条件下对MCF-7细胞内的GSH-CuNPs进行荧光成像。细胞经裂解、离心超滤后,收集GSH-CuNPs,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)对铜元素进行定量分析。通过SPSS统计分析关联胞内平均荧光强度与ICP-MS的定量检测数据,建立平均荧光强度与细胞中CuNPs的定量关系;再以ICP-MS测定细胞内铜元素的总含量,可获得由GSH-CuNPs转化为其它形式的铜含量。采用本方法研究了MCF-7细胞中GSH-CuNPs的代谢/转化过程。结果表明,GSH-CuNPs与细胞孵育50 min后,细胞内CuNPs含量由172.74 fg/cell降低至18.66 fg/cell,且GSH-CuNPs主要代谢转化为可溶性铜。
关键词: 铜纳米粒子, 细胞, 荧光成像, 定量分析, 电感耦合等离子体质谱
激光剥蚀-电感耦合等离子体质谱定量铬方法研究
魏星 , 周静静 , 刘金辉 , 陈明丽 , 王建华
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201514
建立了基体匹配外标法-激光剥蚀电感耦合等离子体质谱(LA-ICP-MS)定量分析凝胶和细胞中铬含量的方法。对标准品分析的相对标准偏差小于16%(n=300),LA-ICP-MS标准曲线相关系数R2=0.9805,方法的检出限为2.22 μg/g。以MCF-7细胞作为体外细胞模型,经含铬培养基孵育后,用变性和非变性两种聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE和Native-PAGE)分离蛋白提取液,并用LA-ICP-MS法对两种电泳方法得到的电泳条带进行线扫描分析,均检测到含铬蛋白条带。采用LA-ICP-MS对单个细胞中的铬元素进行定量分析与成像,细胞元素分布图与显微镜下的细胞轮廓图重叠良好。
关键词: 基体匹配外标法, , 激光剥蚀电感耦合等离子体质谱, 凝胶电泳