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基于AuNP-AuNP-UCNP三联体结构的传感体系高效检测环境雌激素双酚A和雌二醇
李巧凤 , 任舒悦 , 王瑜 , 白家磊 , 彭媛 , 宁保安 , 吕全军 , 高志贤
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171171
构建了一种基于AuNP-AuNP-UCNP三联体结构检测双靶标双酚A和雌二醇的传感体系。在三联体结构的制备中,首先合成金纳米颗粒(AuNPs)和上转换纳米颗粒(NaYF4:Yb,Er,Gd,UCNPs),再对两种纳米颗粒进行表面修饰,分别连接各自的核酸适配体形成两种光学荧光探针,设计一段与两种适配体互补配对的核酸序列,以此互补序列为连接桥,依靠碱基互补配对原则实现三联体结构的制备。用透射电子显微镜(TEM)表征其连接效果。当检测体系同时含有双酚A和雌二醇时,可通过荧光和紫外分光光度计实现高效便捷的双靶标检测。结果表明,反应温度为30℃,pH=7.8时,本方法检测双酚A和雌二醇的线性范围分别为2-200 ng/mL和10-150 ng/mL,检出限分别为0.2和0.5 ng/mL。本方法对双酚A和雌二醇均有较好的特异性识别能力,且三联体结构检测体系的稳定性良好。实际水样中加标回收率均在86.1%-107.4%之间,相对标准偏差 < 6.8%。本方法在实际水样中环境雌激素的快速高效检测方面有良好的应用前景。
关键词: 金纳米颗粒, 上转换纳米颗粒, 三联体, 双酚A, 雌二醇
基于生物条形码结合杂交链式反应双重信号放大检测蓖麻毒素
苑帅 , 霍冰洋 , 张曼 , 王瑜 , 白家磊 , 彭媛 , 宁保安 , 陈萍 , 高志贤
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.181504
建立了一种基于生物条形码结合杂交链式反应扩增的高灵敏、特异性检测蓖麻毒素(Ricin toxin,RT)的方法。使用RT多克隆抗体(pAb)及条形码DNA(Barcode DNA)制备功能性金纳米探针(GNPs),通过与RT单克隆抗体(mAb)共同识别作用,形成"mAb-RT-pAb/AuNPs/Barcode DNA"三明治夹心结构,进一步利用条形码DNA作为引发链触发生物素标记的发卡探针进行杂交链式扩增,形成一条具有重复单元的长双链DNA。当使用辣根过氧化物酶标记链霉亲和素与长链DNA上的生物素结合后,通过鲁米诺与过氧化氢的化学发光底物发光进行测定。结果表明,本方法检测RT的线性范围为0.61 ng/mL~5.00 μg/mL,检出限为0.52 ng/mL(S/N=3),本方法具有较宽的检测范围及较低的检出限,测定饮用水及脱脂牛奶样品中RT的加标回收率在83.4%~112.4%之间,相对标准偏差在2.2%~5.4%之间,表明本方法实用性良好,在食品和饮用水安全控制及防范生物恐怖袭击方面具有良好的应用前景。
关键词: 蓖麻毒素, 生物条形码, 杂交链式反应, 链霉亲和素-生物素, 化学发光