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基于目标诱导银沉积的可视化检测方法的构建及其应用
字琴江 , 王瑾 , 曹秋娥 , 周川华
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171157
制备稳定且易于修饰的纳米金是构建基于金纳米颗粒可视化分析方法的关键。本研究以谷胱甘肽(GSH)为配体,分别采用一步法和两步法制备了两种纳米金颗粒,并对这两种纳米金的粒径、胶体稳定性等性能进行考察,发现两步法合成的纳米金胶体稳定性更好。在此基础上,采用两步法合成的纳米金作为晶种和催化剂,建立了一种基于金属纳米颗粒的非聚集可视化检测抗坏血酸(AA)的方法。此方法结合了目标诱导银沉积反应和纳米银大的摩尔消光系数,利用AA在纳米金的存在下将Ag+还原成银单质所导致的检测液颜色变化及纳米银在410 nm处的吸光度变化,对AA进行定性以及定量检测,检出限为0.75 μmol/L(S/N=3)。此方法具有简单、快速、灵敏、所需仪器设备简单、特异性好、抗干扰能力强等优点,可用于复杂样品中AA的高灵敏检测,在生物检测方面具有良好的应用前景。
关键词: 纳米金, 抗坏血酸, 目标诱导银沉积, 可视化检测
纸型便携式金纳米簇器件可视化检测汞离子
张国 , 冯建军 , 柴瑞涛 , 朱维晃 , 康倩文 , 李卉
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.181808
合成了谷胱甘肽GSH包覆的荧光金纳米簇AuNCs,基于Hg2+-Au+间的高亲合作用实现对汞离子Hg2+的高灵敏性、高选择性荧光检测,线性检测范围为4~200 nmol/L,检出限LOD,S/N=3为2.4 nmol/L。常见的金属离子Ni2+,Mn2+,Co2+,Na+,Ba2+,Cu2+,Zn2+,Mg2+,Cd2+,Ca2+,K+,Fe3+,Al3+,Pb2+和阴离子F-,C2O42-,Cl-,H2PO4,NO3-,SO42-,HCOO-,I-,C5H7O5COO-,CH3COO-,Br-,CO32-对检测没有干扰。基于GSH-AuNCs构筑了两种纸型便携式AuNCs器件:半定量试纸和纸型横向流动检验LFA试剂盒,并成功用于可视化检测自来水样中Hg2+
关键词: 金纳米簇, 纸型器件, 可视化检测, 汞离子, 自来水
分子印迹光子晶体凝胶膜可视化检测葡萄酒中邻氨基苯甲酸甲酯
吴伟珍 , 黄梦霞 , 黄庆达 , 吕彩华 , 赖家平 , 孙慧
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191087
邻氨基苯甲酸甲酯(Methylanthranilate,MA)是我国禁止在葡萄酒中添加的香料,对MA测定是葡萄酒中重要的质控环节。因此,开发快速检测葡萄酒中违禁香料的方法具有重要的实际意义。本研究利用分子印迹技术与光子晶体技术相结合,以MA为模板分子、甲基丙烯酸(MAA)为功能单体、甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)为交联剂,在60℃加热条件下引发聚合,去除光子晶体模板和洗脱印迹分子后得到反蛋白石结构分子印迹光子晶体凝胶膜。研究结果表明,此印迹凝胶膜对MA分子有较好的选择性,在分子识别过程中MA印迹凝胶膜的Bragg衍射峰位置随着MA浓度的增大而发生红移,达到平衡状态的时间为6 min,且偏移值(Δλ)与MA的浓度(C)在0.1~10.0 mmol/L范围内有良好的线性关系,检出限为31 μmol/L,可实现重复循环检测使用。此外,在检测不同浓度印迹分子时,肉眼能够观察到印迹凝胶膜颜色的变化。此智能型凝胶膜可望用于葡萄酒中MA的可视化快速检测。
关键词: 分子印迹, 光子晶体, 可视化检测, 邻氨基苯甲酸甲酯
基于金纳米颗粒的表面等离子体共振效应可视化检测Cr3+
张滕 , 仲逸涵 , 张守婷 , 党昕宇 , 卢小泉
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191306
建立了一种基于柠檬酸修饰的金纳米颗粒(CA-AuNPs)高选择性可视化检测水中痕量Cr3+的方法。用原位还原法在不同pH条件下制备CA-AuNPs,加入痕量Cr3+后,Cr3+与AuNPs表面的柠檬酸根发生螯合作用,使CA-AuNPs发生定向团聚。不同pH条件下制备的CA-AuNPs体系均可发生肉眼可见的颜色变化,由红色变为灰色或无色,加入其它金属离子(Na+、Ca2+、Co2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+、Mg2+、Al3+、Fe3+)则无明显的变化。pH=6的条件下合成的CA-AuNPs最稳定,性能最佳,裸眼比色法的检出限为1.0×10-5 mol/L,紫外-可见吸收光谱法的检出限为40.7 nmol/L,低于国家生活饮用水卫生标准的限量值。建立的基于CA-AuNPs体系的可视化传感器检出限低,选择性好,在药物分析、临床诊断和环境监测等领域具有良好的应用前景。
关键词: 表面等离子体共振, 金纳米颗粒, 铬离子(Ⅲ), 可视化检测
基于金属有机多面体的可视化检测方法的构建及应用
卢朝粉 , 张菊梅 , 秦渝 , 郑立炎 , 曹秋娥 , 周川华
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191623
结合金属有机多面体的高催化活性和抗坏血酸的还原性建立了一种简单、高灵敏的抗坏血酸(AA)可视化检测方法。采用铜离子-有机多面体纳米棒(Copper metal-organic polyhedra nanorods,Cu-MOP)作为类辣根过氧化物酶,在H2O2存在下,Cu-MOP催化氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB),检测液中存在的AA使Cu-MOP中的Cu2+还原,类辣根过氧化物酶催化活性大大降低,抑制Cu-MOP对TMB的催化氧化,因此,可以利用检测液颜色及其吸光度实现对AA的特异性检测。AA的浓度在1.0~30.0 μmol/L及40.0~200 μmol/L范围内与体系452 nm的吸光度(A452 nm)呈线性关系,检出限(S/N=3)为0.68 μmol/L。本方法简单、快速、无需复杂仪器,将其应用于药品中AA的测定,结果令人满意。
关键词: 铜离子-有机多面体纳米棒, 3,3',5,5'-四甲基联苯胺, 抗坏血酸, 可视化检测
核酸侵入反应偶联纳米金探针杂交显色技术可视化检测乙醛脱氢酶2基因多态性位点
盛楠 , 岳慧杰 , 逄淑云 , 齐谢敏 , 张晏洁 , 吴燕子 , 宋沁馨 , 邹秉杰 , 周国华
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.201234
传统的乙醛脱氢酶2(Aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)基因多态性位点(rs671)分型手段包括电泳、测序和荧光探针法,但在实际应用中存在步骤繁琐或检测成本高等问题。本研究基于聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR),将核酸侵入反应和纳米金探针(Gold nanoparticle probe,GNP)杂交显色技术偶联,建立了操作简便的ALDH2基因rs671位点可视化检测方法。在反应体系中,首先对样本DNA进行PCR扩增,再由级联核酸侵入反应识别等位基因,随后加入两种GNP与溶液中的发夹探针杂交显色。当样本DNA包含靶标等位基因时,体系中的发夹探针会在核酸侵入反应阶段被核酸内切酶1(Flap endonuclease 1,FEN1)切割裂解成两部分,这两部分序列分别与两种GNP杂交并分散在溶液中,最终溶液为红色;无靶标等位基因时,体系中的发夹探针保持完整结构,同时与两种GNP杂交,溶液中的GNP聚集,沉淀至管底,最终溶液为无色。因此,根据反应最终溶液的颜色可直接判断基因型。在最优条件下,本方法成功检测了低至80 pg的基因组DNA,并能准确区分3种基因型,表明本方法具有极高的灵敏度和特异性。将本方法用于临床样本ALDH2基因的rs671位点检测,207例样本可视化检测结果与焦磷酸测序分型结果完全一致,表明本方法在精准医学相关的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNP)分型检测方面有潜在的应用前景。
关键词: 乙醛脱氢酶2, 纳米金探针, 可视化检测, 单核苷酸多态性, 核酸侵入反应