首页 杂志概况 投稿须知 在线投稿 在线阅读 征订启事 广告服务 行业资讯 企业动态 资料中心  专访报道 会展信息 ENGLISH

在线审稿投稿系统

在线阅读

搜索结果

胶束电动色谱技术在蛋白质分离分析中的应用研究进展
高凡 , 王晓飞 , 张博
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.181742
胶束电动色谱(MEKC)作为一种兼具色谱和电泳分离机理的方法,既具有准固定相与分析物间的相互作用,又可以利用带电分子在电场中迁移行为的差异进行分离。MEKC的这些特点在蛋白质和多肽这类具有高维度数的生物分子的分离中得到了很好的体现。无论是单维分离,还是多维分离,MEKC都显现出在生物大分子分离方面良好的应用前景。近年来,随着CE-MS的不断发展,出现了很多新的MEKC-MS联用技术,进一步显示了MEKC在蛋白质与多肽分离分析中的应用前景。本文首先对胶束电动色谱技术进行了简介,综述了近年来胶束电动色谱技术在蛋白质分离分析中的研究应用进展,并对其发展前景进行了展望。
关键词: 胶束电动色谱, 表面活性剂, 毛细管电泳, 蛋白质, 多肽, 质谱, 评述
毛细管电泳筛选盐酸克伦特罗核酸适配体的方法研究
杨歌 , 朱超 , 刘晓慧 , 王勇 , 屈锋
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.181347
毛细管电泳(CE)被认为是核酸适配体筛选的高效方法,其无需介质固定,在溶液相中完成筛选,分离高效,样品用量少,筛选成本低。但由于小分子靶与核酸的结合位点少,且小分子的核酸复合物与核酸库的电泳迁移率差异小,通常认为CE-SELEX不适用于筛选小分子靶标的适配体。本研究建立了基于CE-SELEX的盐酸克伦特罗靶标的的适配体筛选方法。将80 nt的ssDNA库与盐酸克伦特罗特混合孵育,通过CZE-UV分离混合物。收集ssDNA库峰前的馏分,通过PCR扩增和ssDNA制备,完成第一轮筛选。将次级核酸库经过3轮筛选,获得10条ssDNA序列。选择3条亲和力较强的序列Apt 4、Apt 7、Apt 12,通过CE-LIF测定其与盐酸克伦特罗的Kd分别为9.315×10-7 mol/L、1.040×10-6 mol/L和1.143×10-5 mol/L。软件分析表明,上述3条序列均可形成茎环二级结构,其中Apt 4茎环结构的自由能最低,结构最稳定。以沙丁胺醇为对照,验证了3条序列,具有较高的特异性。
关键词: 盐酸克伦特罗, 核酸适配体筛选, 毛细管电泳, 毛细管电泳-指数富集配体系统进化
基于纳米水凝胶颗粒的毛细管电泳法分离DNA
张禾蓉 , 易达 , 孟子晖 , 薛敏 , 汪海林 , 冯金生
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191009
采用乳液聚合法,在水相中制备了一系列纳米水凝胶颗粒(NPs),基于动态涂层法应用于毛细管电泳分离DNA片段。动态光散射表征结果表明,所制备的NPs分散性好、粒径分布均匀。基于NPs交联网络结构将其作为毛细管电泳分离介质,结果表明,单体的用量、纳米颗粒的粒径以及NPs在毛细管电泳中的浓度对DNA分离效果都有影响。当单体采用N-异丙基丙烯酰胺(87%)、丙烯酸羟乙酯(8%)和丙烯酸(4%),交联剂为NN'-亚甲基双丙烯酰胺(1%)时,通过改变表面活性剂十二烷基磺酸钠(SDS)的用量,可以改变所制备的纳米颗粒粒径,当SDS用量为53 mg时,NPs粒径约480 nm。将此NPs(8.0 mg/mL)加入TG缓冲溶液(25 mmol/L Tris,192 mmol/L甘氨酸,pH 8.3)用于毛细管电泳,3个长度DNA片段(20、50和80 nt)可实现完全分离,分离效果好,且迁移时间较短。
关键词: 纳米水凝胶颗粒, 毛细管电泳, DNA分离