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新型氯霉素化学发光芯片免疫检测方法的建立及应用
任帅 , 丁乔棋 , 李丽 , 邵漫雨 , 宋素泉 , 闫丽萍
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.181189
采用氯霉素(CAP)全抗原CAP-HS-BSA免疫新西兰兔,获得抗CAP多克隆抗体,测得效价为2×105,此抗体与CAP结构类似物的交叉反应率均小于0.01%,特异性良好。在此基础上,分别建立了特异性检测氯霉素残留的间接竞争酶联免疫吸附法(ic-ELISA)和基于iPDMS膜的化学发光芯片免疫检测法,并用于实际牛奶样品中CAP的检测。建立的ic-ELISA法的半数抑制浓度(IC50)为12.9 ng/mL,线性检测范围(IC20~IC80)为0.8~250.0 ng/mL,检出限(IC10)为0.1 ng/mL,回归方程B/B0=-0.2028lgCCAP+0.7281(R2=0.9926)。牛奶样品中加标回收率为81.8%~97.9%,相对标准偏差(RSD)小于10%。建立的化学发光芯片免疫检测方法的半数抑制浓度为263.0 ng/mL,线性范围(IC20~IC80)为1~5000 ng/mL之间,检出限(IC10)为1 ng/mL,回归方程B/B0=-0.1781 lgCCAP+0.9318(R2=0.9891),牛奶中CAP的加标回收率为77.0%-100.5%,RSD < 15%。
关键词: 氯霉素, 多克隆抗体, 间接竞争酶联免疫分析, 化学发光, 芯片免疫
氯霉素单分散限进分子印迹聚合物的制备及其识别特性研究
吴姗姗 , 孙治安 , 田央 , 周彦强 , 刘华春 , 龚波林
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.181576
以自制的单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA/EDMA)为固相基质,氯霉素(CAP)为模板分子,采用表面原子转移自由基聚合技术(SI-ATRP)制备氯霉素单分散限进分子印迹聚合物(CAP-MRAM-MIPs)。采用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)、热重(TGA)、元素分析和接触角等方法对其表征,比表面积、孔体积和孔径的结果表明,与氯霉素单分散限进非印迹聚合物(CAP-MRAM-NIPs)相比,CAP-MRAM-MIPs具有更大的孔径和孔体积。CAP-MRAM-MIPs对牛血清白蛋白(BSA)的排阻能力为97.2%;对CAP的最大吸附量为56.7 mg/g,分配系数(Kd)为34.42 mL/g,印迹因子(α)为2.25。将CAP-MRAM-MIPs用于分离富集牛奶中的CAP,应用高效液相色谱(HPLC)检测,加标回收率为93.5%~102.6%。
关键词: 氯霉素, 单分散限进分子印迹聚合物, 牛血清白蛋白, 吸附, 固相萃取