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硫化氢信号分子与L-乳酸脱氢酶蛋白相互作用机制的研究
朱艳雯 , 刘玲 , 孙玮洁 , 颜廷才 , 檀德宏 , 张瑶 , 白冰
doi:  10.11895/j.issn.0253-3820.171510
硫化氢(H2S)作为信号分子与目标蛋白相互作用而实现信号传导机制的研究一直是研究热点。本研究以L-乳酸脱氢酶为目标蛋白,选用3种H2S供体试剂(NaHS、Na2S、PS),采用分子荧光实时监测L-乳酸脱氢酶活性变化,研究H2S与目标蛋白的相互作用。SDS-PAGE电泳结果显示,H2S不是通过形成二硫键/三硫键的方式与L-乳酸脱氢酶蛋白相互作用;圆二色谱结果表明,L-乳酸脱氢酶的二级结构发生变化,提示H2S可能存在半胱氨酸巯基衍生能力,以硫烷硫存在的PS具有最强的巯基作用力;MALDI-TOF-MS/MS分析结果表明,L-乳酸脱氢酶蛋白中部分半胱氨酸巯基位点发生了硫烷化,进一步揭示了H2S是通过与活性半胱氨酸巯基位点硫烷化的方式与L-乳酸脱氢酶发生作用。
关键词: 硫化氢, L-乳酸脱氢酶, 半胱氨酸巯基, 硫烷化
新型比色荧光双通道探针用于硫化氢的检测
王肖莉 , 姚猛 , 李引 , 魏超 , 王美
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191451
以7-硝基苯并呋咱(NBD)为荧光团,经一步有机合成,高产率制备比色荧光双通道探针,用于检测环境和体内硫化氢(H2S)的含量。以无水Na2S为H2S供体,考察了探针的选择性、灵敏性等性能。结果表明,探针荧光强度与H2S浓度在5-50 μmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,检出限为0.125 μmol/L,同时反应溶液由无色变为紫色。采用MTT法测试探针的细胞毒性,结果表明,在探针浓度低于50 μmol/L条件下,细胞存活率高于90%。激光扫描共聚焦显微成像结果表明,探针可靶向细胞溶酶体,可对溶酶体内H2S进行成像研究。
关键词: 硫化氢, 比色检测, 荧光探针, 细胞成像
气体信号分子硫化氢的活体检测方法研究进展
陈仲辉 , 陈宇 , 翁爱彬 , 罗芳 , 郭隆华 , 邱彬 , 林振宇 , 陈国南
doi:  10.19756/j.issn.0253-3820.191366
脑神经相关的各种生理和病理过程需在众多生理活性物质的共同参与下完成。硫化氢(H2S)作为第三类内源性气体信号分子,在维持中枢神经系统正常的生理机能方面起重要的调节作用。因此,在活体层次实现H2S的精准定量分析,将极大推动人类揭秘脑神经过程中的分子机制的研究进程。然而,H2S具有较强的还原性和易挥发性,其物理化学性质与脑内含巯基化合物相似,实现H2S的高选择性的分离分析成为其检测的关键科学问题。本文综述了近年来各类型H2S检测方法的设计原理及研究进展,对相关研究的发展前景进行了展望。
关键词: 硫化氢, 活体检测方法, 评述